PCR是什么意思？PCR的全称是聚合酶链式反应（Polymerase Chain Reaction），简单说就是利用人工技术不断将DNA进行复制，一变为二，二变为四，呈指数增长。一般情况下提取的DNA样本浓度都比较低，通常要通过PCR扩增后，才能用于检测、测序、转基因等实验。

标准的PCR过程包括三个步骤：变性(Denaturation)——退火(Annealing)——延伸(Extension)。

一、变性：

利用高温（通常为90～95℃）使双链DNA间的氢键断裂，形成单链DNA。变性的时间和温度取决于DNA片段的复杂程度、GC含量、大小和缓冲液的盐浓度。

二、退火：

是指在DNA双链形成单链后，降低温度使得引物结合在单链DNA目标区域上。一般情况下，能够供引物完成退火的孵育时间为0.5-2min，通过计算PCR扩增引物的熔解温度（Tm），可确定适当的退火温度，通常比引物的Tm低上3–5℃。

说明：Tm指DNA双螺旋结构热变性过程中吸光值增加到最大值一半时的温度，由于这一现象和结晶的熔解过程类似，又称熔解温度。引物的Tm即是引物50%序列与其互补序列形成双链DNA分子时的温度。

三、延伸：

指DNA模板--引物结合物在DNA聚合酶的作用下，以dNTP为反应原料，目标序列为模板，按照碱基互补配对与半保留复制原理，合成一条新的与模板DNA 链互补的链。

通常温度设定在70–75℃之间，热稳定性DNA聚合酶的活性最佳。PCR的延伸时间取决于DNA聚合酶的合成速度以及目标DNA的长度。当目的片段的扩增长度较长（如，>10 kb）时，除了需要增加延伸时间，还需要降低温度，以确保引物结合并在长时间循环中维持酶活性。

另外，假如引物退火温度与延伸温度相差未超过3℃，则退火和延伸温度可合并成一步，称为两步PCR法，可取代传统的三步PCR法。两步PCR法无需在退火和延伸之间转换和稳定温度，从而缩短了PCR所需的时间。通过重复变性--退火--延伸这三个过程，即可获得更多的“半保留复制链”，而这种新链又能作为下个循环的模板，不断循环。

采用PCR 技术，利用序列特异性寡核苷酸、热稳定性DNA聚合酶等试剂和PCR仪，可将DNA或cDNA模板内的特异性序列拷贝或扩增数千至数百万倍。现在大家知道PCR是什么意思了吧，欢迎感兴趣的同学评论沟通哦~